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2017年石景山區中學生研究性學習成果二等獎:枇杷葉中黃酮的含量

作者:    瀏覽次數:903     【關閉
組長:郭晨霄   組員:劉銘軒、信卓寧、巴雨桐、楊潤聰、雒皓天、孫翰翔

指導教師:張海南 王紅光

獲2017年石景山區中學生研究性成果二等獎

【摘要】由于黃銅在諸多方面的顯著功效,在植物中提取天然黃銅最為健康安全,所以我們將關注點放在從枇杷葉中提取天然黃銅,并測量該植物中黃銅的具體含量,檢測該植物是否適合長期大量提取黃銅。
【關鍵詞】枇杷葉  黃酮  超聲波震碎儀
一、引言
        黃酮的功效是多方面的,它是一種很強的抗氧劑,可有效清除體內的氧自由基,如花青素可以抑制油脂性、過氧化物的全階段溢出,這種阻止氧化的能力是維生素E的十倍以上,這種抗氧化作用可以阻止細胞的退化、衰老,也可阻止癌癥的發生。它可以改善血液循環,可以降低膽固醇,向天果中的黃酮還含有一種PAF抗凝因子,這些作用大大降低了心腦血管疾病的發病率,也可改善心腦血管疾病的癥狀。
        同時,被稱為花色苷酸的黃酮化合物在動物實驗中被證明可以降低26%的血糖和39%的三元脂肪酸丙酯,這種降低血糖的功效是很神奇的,但更重要的是它對穩定膠原質的作用,因此它對糖尿病引起的視網膜病及毛細血管脆化有很好的作用。另外,它還可以抑制炎性生物酶的滲出,可以增進傷口愈合和止痛,櫟素由于具有強抗組織胺性,可以用于各類敏感癥。
        所以,基于以上黃銅的諸多重要功效,本試驗試圖從枇杷葉中提取天然黃銅,并測量黃銅的具體含量,為其他研究人員提供數據支撐。
二、研究背景
        枇杷葉為薔薇科植物枇杷的干燥葉,別名巴葉、蘆桔葉, 廣泛分布于我國中南及陜西、甘肅、江蘇、安徽、浙江、江西、福建、臺灣、四川、貴州、云南等地。枇杷葉是一味常用中藥,其味苦、微辛,性微寒,主治肺熱咳嗽、陰虛勞咳、濕疹等癥。
        目前從枇杷葉中可以分離出多種黃酮類成分。同時,研究發現黃酮類化合物具有良好的抗氧化、降血脂、抗炎增強免疫等作用,是枇杷葉中的有效成分。因此對枇杷葉中黃酮類成分進行含量測定對枇杷葉的質量控制有重要意義。
三、研究儀器及材料
    1.實驗儀器:音波震碎儀,細胞觀察器,試管。
    2.實驗材料:枇杷葉。
四、研究方法
        乙醇法提取枇杷葉中的黃酮量。
五、研究目的
        認識枇杷葉藥材,了解黃酮類成分的顯色反應,熟悉中藥有效成分的含量測定過程。
六、實驗步驟
        1.藥材采集:從中山植物園藥物園中采集枇杷葉藥材,了解枇杷葉的形態、習性和生長環境。
        2.樣品預處理:對采集樣品洗凈、烘干、粉碎。了解中草藥的處理過程。
        3.樣品提?。壕芊Q取2.0g樣品粉末至三角瓶中;加入50ml70%乙醇溶液;放入超聲儀中,超聲提取1次,每次提取40min。過濾,取25mL續濾液。另精密稱取蘆丁對照品用70%乙醇溶解配置成對照品溶液0.345mg/mL。
        4.樣品總黃酮含量測定:對枇杷葉樣品進行黃酮成分含量測定,了解黃酮的顯色反應和含量測定步驟。精密移取0,5,10,20,30,40,50μL蘆丁標準溶液于96孔平板中,以70%乙醇溶液為空白。依次加入3μL 5% 亞硝酸鈉溶液,搖勻,靜置6min;再加入3μL 10% 硝酸鋁溶液,搖勻,靜置6min;再加入40μL 的4%氫氧化鈉溶液,以70%乙醇溶液補足溶劑至100μL,搖勻,靜置15min;將96孔平板放入酶標儀中在510nm波長處測吸光值,每個檢測做3個重復,取其平均值。以吸光值(y)和蘆丁含量(x)繪制總黃酮含量標準曲線。
七、數據分析

八、實驗結果及分析
        我們使用的材料是琵琶葉,進行洗凈烘干后用粉碎機粉碎,裝入密封袋備用,然后進行稱重,每袋的重量必須是一樣的,在進行完裝袋后,我們來到了實驗室。首先我們采用了用乙醇浸泡進行的一次實驗。在這次實驗中用乙醇浸泡需要八個夜晚,由于我們因為時間有限,所有用的是泡好的,裝入進行超聲波震動,以震碎細胞的方式,提取黃酮。在這之中首先要做的是在震動容器中是震動四十分鐘。四十分鐘后我們來到了教室,這時我們已經提取了第一波黃酮,這就是用乙醇提取黃酮的方法,然而我們看到的液體是呈淡黃色的,聞起來沒有非常刺鼻的異味,然后我們將這種液體倒入試管中,放入細胞,進行觀察,發現細胞已經破裂,而這都是因為音波將細胞震碎的原因。這樣我們能更好的觀察到提取黃酮的過程,以及結果。最后得出結論是,把枇杷葉放入乙醇中,在音波震碎儀下進行六十分鐘的震碎,這樣細胞可以完全破裂,我們就可以觀察到在枇杷葉中提取的黃酮。最后放入觀察鏡下進行觀察得取結論。
        枇杷是小喬木,葉邊緣程鋸齒狀,葉背面有微小絨毛,花期在11月到1月,1月份可見枇杷葉白色花朵。蘆丁對照品和樣品在加入3種顯色劑后,液體顯紅色。
        在這次實驗中,我們小組收獲到了團結友誼以及分工協作的好處,這樣可以事半功倍,在這次的觀察中我們也觀察到了一些有關于用乙醇提取枇杷葉中黃酮的過程,而且接觸到了許多儀器,并且學會了使用它們,這在我們今后的物理和化學學習中將起到非常大的作用,但這次我們也有一些缺點,比如:起初小組做實驗時有些手忙腳亂,有些時候在實驗推測時會有些爭議,但在后面的學習和實驗過程中我們都化解了這些問題,并且變得十分團結,總之這次科考活動讓我們受益匪淺。

致謝詞
        感謝輔導老師在這次活動中給予我的無微不至的關懷和照顧!老師們在學習和生活中對我的關懷和教導使我受益匪淺,終生難忘。他們嚴謹的工作作風和治學態度,淵博的學術知識,認真的工作精神都給我留下了深刻的印象,是我終生學習的榜樣。還有那些在背后默默無聞的科學家們,是他們在教我們,在培育我們,他們看上去和普通人一樣始終不告訴別人自己的身份,有了他們,中國才會像今天一樣強大,如果沒有他們中國將會任人欺辱,所以在此,我們小組向敬愛的老師和科學家們致以最衷心的感謝!

參考文獻:
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